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黄曲霉毒素A检测试剂盒的实验原理及检测方法

发布时间: 2022-08-11  点击次数: 776次
   黄曲霉毒素A检测试剂盒主要是用于玉米、大米、麦类、豆类、花生、花生酱中黄曲霉毒素B1(AFB1)残留的定量检测。黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液,动物饲料相关的产品中。
  
  实验原理:
  黄曲霉毒素A检测试剂盒采用直接竞争ELISA方法,在微孔板包被有黄曲霉毒素B1(AFB1)偶联抗原,加入黄曲霉毒素B1(AFB1)标准品或样品,游离黄曲霉毒素B1(AFB1)微孔条上预包被的黄曲霉毒素B1(AFB1)偶联抗原互相竞争抗黄曲霉毒素B1(AFB1)体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量成反比,通过标准曲线计算样品中黄曲霉毒素B1(AFB1)的含量。
  
  黄曲霉毒素部分检测方法:
  1、生物传感法:生物传感器是使用固定化技术将具有分子识别能力的生物活性物质与物理化学换能器结合,可以用来探测生物体内外的环境化学物质或与之起特异性交互作用后产生响应的一种装置。
  2、金标试纸法:金标试纸法,实际就是一种固相免疫分析法。
  3、荧光光度法:IAC/SFB法也是一种常用的国标方法。该方法的原理是利用各种黄曲霉素的荧光特性差异用荧光光度计测定试样中黄曲霉素的含量。
  4、毛细管电泳法:毛细管电泳(CE)也是一种新发展起来的分析黄曲霉素的方法。该方法与激光减弱荧光检测器(LIF)连用可很好地提高灵敏度。
  5、酶联免疫法(ELISA):ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。
  6、液相色谱法(HPLC):HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。
  7、薄层分析法(TLC):TLC法是检测黄曲霉素为经典的方法,也是以前为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。