胰岛素ELISA试剂盒的实验原理是将纯化的ins抗体包入微孔板中制成固相载体。将样品或标准物质、生物素ins抗体和HRP标记的亲和元件依次加入微孔中,洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转为蓝色,在酸的作用下转为黄色。颜色的深度与样品中的INS呈正相关。用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(值),计算样品浓度。
关于胰岛素ELISA试剂盒的相关知识点扩展:
1、试剂的储存与稳定性
所有打开的试剂在2-8℃下保存,保质期内不允许过期。所有打开的试剂应储存在2-8℃。一旦微孔板的包装打开,就需要重新密封。
2、样品的准备
将所有的试剂和所需要的板条在使用前平衡至室温。
洗涤液:用1170ml的蒸馏水稀释30ml浓缩的洗涤液,终得到的容积为1200ml,稀释好的洗涤液在室温下可稳定存放两个星期。
3、样品的收集
此ELISA试剂盒可使用血清也可使用(只有肝素或柠檬酸盐抗凝的血浆)血浆作为样品。
不能使用明显溶血﹑黄疸和脂血的样品。
血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下离心分离血清。
血浆:将全血采集到含有抗凝剂的离心管,采集后立即离心分离。
4、样品的储存:
样品盖好盖子后,可在实验前2-8℃下储存5天,要更长时间储存,应在-20℃下冻存。在开始实验前应避免反复冻融样品。
5、样品的稀释:
在初次试验中,如果样品的浓度高于高标准,则应按照试验程序的规定将样品稀释10倍或100倍。计算浓度时,稀释度乘以此值。
例子:
a)按1:10稀释:10μL的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)。
b)按1:100释稀:10μL按a)稀释的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)
好了,以上便是关于胰岛素ELISA试剂盒的相关内容介绍了。