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大鼠胰岛素ELISA试剂盒的使用方法是什么呢,您可知道

发布时间: 2021-03-11  点击次数: 115次
  胰岛素ELISA试剂盒是一种基于夹心法原理的固相酶联免疫吸附试验(ELISA)。反应板上的微检测孔涂有单克隆抗体,可与胰岛素分子上独特的抗原位点结合。将含有内源性胰岛素的患者样本与生物素标记的抗胰岛素抗体酶复合物在包切孔中孵育。
  孵育后,用洗涤液洗涤未结合的酶复合物。二次升温时,链亲和过氧化物酶复合物与生物素抗胰岛素抗体结合,结合量与样品中胰岛素浓度成正比。显示的颜色强度与添加底物后患者样本中胰岛素的浓度成正比。

胰岛素ELISA试剂盒

  大鼠胰岛素ELISA试剂盒的使用方法如下:
  实验前,所有试剂应平衡至室温,试剂不能直接溶解于37。配制试剂或样品时,应充分混合,混合时应避免气泡。实验前,应预测样品含量。如果样品浓度过高,应稀释样品,使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围。计算时,应乘以相应的稀释倍数。
  1、加样:分别设置空白孔、标准孔和待测样品孔。向空白孔中加入样品稀释剂100,分别加入标准品或待测样品100。注意不要有气泡。加入样品时,将样品加入酶标板底部,尽量不要碰到孔壁,轻轻摇匀。在酶标板上加盖或膜,37℃保存2小时。为保证实验结果的有效性,请每次实验使用新的标准溶液。
  2、弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100(临用前配制),酶标板加上覆膜,37温育1小时。
  3、弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
  4、每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100,加上覆膜,37温育1小时。
  5、弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
  6、向每个孔、酶标板和37号包衣中加入90底物溶液,避免出现浅色(反应时间控制在15-30分钟,当标准孔的前3-4个孔有明显的蓝色梯度,后3-4个孔的蓝色梯度不明显时终止反应)。
  7、每孔加终止溶液50,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
  8、立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(值)。
  好了,以上便是关于胰岛素ELISA试剂盒的相关内容介绍了。

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