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猪伪狂犬病毒抗体检测试剂盒的原理及注意事项

发布时间: 2022-07-20  点击次数: 37次
   猪伪狂犬病毒抗体检测试剂盒可用于检测猪血清、血浆中猪伪狂犬病毒抗体,可用于猪伪狂犬病毒疫苗免疫效果评价。伪狂犬病毒(Pseudorabiesdiseasevirus,PRV)可引起猪伪狂犬病,导致怀孕母猪流产死胎、种猪不育、仔猪发病死亡等综合症候群。
  
  原理:
  猪伪狂犬病毒抗体检测试剂盒由预包被猪伪狂犬病毒重组gD蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪伪狂犬病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猪伪狂犬病毒抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪伪狂犬病毒抗体。
  
  注意事项:
  1、试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀,使用后放回2-8℃。
  2、不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
  3、底物和终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。
  4、TMB(显色液)不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
  5、检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃)。
  6、所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
  7、严格遵守操作说明可以获得好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
  8、血清稀释板为一次性用品,不得重复使用;血清稀释板的最大容量为300μl/孔。
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