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使用ELISA试剂盒之前,建议多了解一些相关知识

发布时间: 2021-04-02  点击次数: 108次
  ELISA试剂盒在国内有许多种叫法:例如:ELISA检测试剂盒、ELISAKit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。本品自从60-70时代问世以来,得到科研工作者的认可及推重,在欧美及我国获得很大的推广,尤其是国内生化范畴的长足发展。它是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验确诊方法。由于其试剂安稳、易保存,操作简洁,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学查验的各范畴中。是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗体ELISA检测。
  ELISA试剂盒在实际测定操作中要留意以下几点:
  一、温度
  1.试剂盒回温
  大多数试剂盒为冷藏(2℃-8℃)保存。从冰箱拿出来后,先不要急于翻开试剂盒,要等试剂盒的温度平衡至室温且试剂盒盒表面无冷凝水。检测所用的试剂需充分混匀且溶解后再用。提早1~2小时取出试剂盒,放在室温中;或在预设25℃恒温培养箱中平衡30分钟~60分钟。
  2.环境温度的操控
  可采用以下办法操控温度:
  1)试验室应配备温湿度表,且确保定时计量。
  2)依据天气情况设定试验室空调制冷或加温功能,待室温安稳且无搅扰的条件下再开端检测流程。
  3)选用带温控设备的孵育仪器,如恒温孵育器、恒温培养箱、多功能酶标仪等。留意要提早敞开预热。
  3.孵育
  孵育时要确保温度均匀,防止蒸发变干。孵育时运用封板膜,并置于暗处孵育。多块板一起试验时,要平放各板,不要叠放,避免温度扩散的不均匀性或边缘效应。
  二、加样
  1.加样要快速准确,时刻宜操控在15分钟内。
  2.如样品量较大,可分次完成试验,或将测样液置于预混微孔板中运用多通道移液器快速移取。
  3.汲取同一试剂,可将试剂倒入V型加样槽中,运用多通道移液器快速移取。
  三、妥善保存
  试剂盒至室温后,取出要运用的酶标板孔,未运用的酶标板孔应及时放回铝箔袋,加入干燥剂,封紧封口,2℃-8℃冷藏保存。切忌将未平衡至室温的酶标板放回铝箔袋,因为此刻因为温度差,酶标板上会有水汽,不利于安稳保存。大多数试剂盒加样后反应时刻较短,环境温度对检测成果会有很大影响,所以操控好环境温度是确保试剂盒检测成果有用的重要因素。
  此外,这些试验忌讳,是您万万不可触碰的:
  1、浓洗刷液或许会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗刷时不影响成果。
  2、如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先将样本稀释必定倍数(n倍)后再测定,计算时请终乘以稀释倍数(×5×n)。
  3、各步加样均应运用加样器,并常常校正其正确性,以防止试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数目多,举荐运用排枪加样。
  4、封板膜只限一次性运用,以防止交叉污染。
  5、严格按照说明书的操作进行,ELISA试剂盒试验成果断定有必要以酶标仪读数为准。
  6、从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装进密封袋中保存。
  7、所有样品,洗刷液和各种废弃物都应按感染物处理。
  8、本试剂不同批号组分不得混用。

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