胰岛素ELISA试剂盒的主要成分及在实验中所需材料分享
胰岛素ELISA试剂盒标准品液配制,使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成8000pg/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在一管中加入8000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。
胰岛素ELISA试剂盒的主要成分有哪些呢?
1、微孔板:12×8,96孔,包被抗胰岛素的单克隆抗体。
2、零标准品 :1支,3ml,即用,0μIU/ml。
3、标准品1-5:5支,1ml,即用,6.25;12.5;25;50;100μlU/ml。
4、酶联物:1支,5ml,即用,生物素化的鼠单克隆抗体。
5、酶复合物:1支,7ml,即用,辣根过氧化物-链亲和素复合物。
6、TMB底物液:1支 14ml 即用。
7、终止液: 1支 14ml 即用 包含0.5M硫酸,请勿接触终止液,以免刺激或着烧皮肤。
8、洗涤液:1瓶,30ml,40倍浓缩,见试剂准备。
注意:用样品稀释的零标准品视需要而定。
胰岛素ELISA试剂盒在做实验时,须准备好下面这些材料:
1、酶标仪
2、标准移液器
3、吸水纸
4、蒸馏水
标本的采集及保存
1、血清:全血标本请于室温放置2小时或4过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于1000g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
3、其它生物标本:请1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
注:以上标本均应密封保存,4保存应小于1周,-20不应超过1个月,-80不应超过2个月;标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。