简述生长因子elisa试剂盒的操作流程
生长因子elisa试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人血小板衍生生长因子（PDGF）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人血小板衍生生长因子（PDGF）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
生长因子elisa试剂盒操作流程如下：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入pbs50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的hrp-标记的抗兔抗体工作液100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加tmb显色液100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl2mol/lh2so4终止反应。
（12）分别测450nm吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差（w1-w2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（s）和阴性对照（n）的od值后，计算s/n值。s/n***2.1为阳性判定标准。
结果判断：
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
生长因子elisa试剂盒实验说明：
1、试剂盒保存：-20（较长时间不用时）；2-8（频繁使用时）。
2、浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3、中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4、刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
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