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胰岛素ELISA试剂盒的操作流程

发布时间: 2023-05-11  点击次数: 470次
  胰岛素ELISA试剂盒是一种常见的生物化学实验工具,用于检测血液中的胰岛素含量。它作为一种常用的生物化学实验工具,具有操作简便、准确性高、灵敏度强等优点,在糖尿病等相关疾病的诊断和治疗中发挥着重要的作用。
 
  一、原理
 
  ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)试剂盒是基于酶标记技术和免疫学原理的试剂盒。在胰岛素ELISA试剂盒中,首先将包含特异性抗体的固相载体放在微孔板上,然后加入待测标本和酶标记的二抗,随后进行洗涤步骤,最后加入底物,观察反应产物的信号强度,并根据参比标准曲线计算出待测样品中的胰岛素含量。
 
  二、操作流程
 
  1、样品处理:将待测血清离心去除悬浮物,得到清澈的上清液。
 
  2、准备试剂:将试剂盒内所需试剂取出并恢复至室温。
 
  3、样品加标:将待测标本和标准品依次加入微孔板中,每个孔添加适量的样品,注意对照孔要做好空白对照。
 
  4、孵育:将微孔板加盖并在恒温水浴中孵育,使抗体与样品中的胰岛素结合。
 
  5、洗涤:用洗涤缓冲液反复洗涤微孔板,去除未结合的物质。
 
  6、添加酶标记的二抗:将酶标记的二抗加入每个孔中,孵育一段时间后再次洗涤。
 
  7、添加底物:向每个孔中添加底物,使其和酶标记形成显色产物。
 
  8、终止反应:在适当的时间内,加入终止剂停止显色反应。
 
  9、测量吸光度:利用酶标仪检测孔内显色产物的吸光度。
 
  三、应用
 
  胰岛素ELISA试剂盒广泛用于临床医学中对糖尿病患者血液中胰岛素含量进行定量检测,也可用于研究中对胰岛素和胰岛素类似物的测定。此外,ELISA技术还可以应用于药物筛选、蛋白质相互作用研究等领域。

胰岛素ELISA试剂盒