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关于人白介素ELISA试剂盒,那些不得不说的事

发布时间: 2021-03-31  点击次数: 89次
  人白介素ELISA试剂盒灵敏、高校、均匀、吸附性好、回收率高。是一种购买按全的ELISA试剂盒产品。用双抗体夹心法测定人白细胞介素水平。纯化后的人白细胞介素抗体用微孔板包被制成固体抗体。然后将抗体加入包被的单克隆抗体的微孔中,与HRP标记的IL抗体结合形成抗体-抗原-酶-抗体复合物。清洗后,加入基质TMB显色。
  TMB在HRP酶的催化下转为蓝色,在酸性条件下转为黄色。颜色的深度与样品中的白细胞介素呈正相关。用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值),用标准曲线计算样品中人白细胞介素的含量。

人白介素ELISA试剂盒

 

  人白介素ELISA试剂盒的使用方法是什么呢?
  1、试剂准备:所有试剂都须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
  2、加样:加样或试剂时,请注意,取样/标准品、酶复合物或底物时,前孔与后孔加样的时间间隔过大,会导致“孵育”时间不同,这将显着影响测量值的准确性和重复性。一次加样时间(包括标准品和所有样品)控制在10分钟以内。如果样品较多,建议用多通道移液管加样。
  3、孵育:为防止样品蒸发,试验时应将反应板放在一个用湿布覆盖的封闭箱内,并对酶板进行覆盖或涂膜,以防液体蒸发;清洗后应尽快进行下一步操作,酶板应随时保持干燥同时,严格遵守给定的孵育时间和温度。
  4、洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
  5、试剂配制:使用前,检测A和检测B应离心几次或几次以下,然后再使用,使液体沉积在管壁或瓶盖上,直至管底。标准品、供试品溶液的工作液a和工作液B应按要求量使用,并用相应的稀释剂配制,不能混淆。请务必配置好标准液和工作液,尽量不要微量配置(如果检测液a被吸收,一次不得少于10μl),以免稀释不准确造成浓度误差;不要重复使用稀释后的标准液、工作液a或工作液B。
  6、反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
  7、底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
  建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
  如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。
  好了,以上便是关于人白介素ELISA试剂盒的相关内容介绍了。

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